Agora um lendário Master Assassin, Ezio deve viajar para a maior cidade da Itália, Roma, centro de poder, ganância e corrupção para atacar o coração do inimigo. Derrotar os tiranos corruptos entrincheirados exigirá não apenas força, mas liderança, já que Ezio comanda uma Fraternidade inteira que se unirá ao seu lado. Apenas trabalhando juntos os Assassinos podem derrotar seus inimigos mortais. Assassin's Creed Brotherhood oferece uma camada multijogador nunca antes vista. Os jogadores podem ajudar os Templários usando a Abstergo para treinar na arte do Assassinato para eliminar os Assassinos de uma vez por todas. Os jogadores podem escolher entre uma ampla gama de personagens únicos, cada um com suas próprias armas e técnicas de assassinato, e comparar suas habilidades com outros jogadores de todo o mundo em diferentes modos de jogo.